GB5413.10-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素K1的測定內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛，可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測，全國近千家合作實驗室，CMA/CNAS資質齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下GB5413.10-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素K1的測定標準內容。

1.范圍

本標準規定了嬰幼兒食品和乳品中維生素K1的測定方法。

本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素K1的測定。

2.規范性引用文件

本標準中引用的文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。

3.原理

用脂肪酶降解試樣中的脂肪和不飽和脂肪酸,對于含淀粉試樣需先用淀粉酶降解試樣中的淀粉,經堿皂化后,用正己烷提取維生素K1。通過液相色譜法分離,柱后還原維生素K1,熒光檢測器檢測,外標法定量。

4.試劑和材料

除非另有規定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的一級水。

4.1 氫氧化鈉溶液(10mol/L):臨用前配制。

4.2 95%乙醇。

4.3 飽和氯化鈉溶液。

4.4 正己烷:色譜純。

4.5 無水硫酸鈉。

4.6 甲醇:色譜純。

4.7 二氯甲烷:色譜純。

4.8 冰醋酸。

4.9 氯化鋅。

4.10 無水乙酸鈉。

4.11 流動相:甲醇(4.6)900mL,二氯甲烷(4.7)100mL,冰醋酸(4.8)0.3mL,氯化鋅(4.9)1.5g,無水乙酸鈉(4.10)0.5g,溶解后用0.45μm濾膜過濾。

4.12 淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。

4.13 脂肪酶:酶活力≥700U/mg。

4.14 鋅粉:粒度50μm～70μm。

4.15 維生素K1標準溶液:標準溶液濃度校正方法參見附錄A。

4.15.1 維生素K1標準貯備液(2mg/mL):稱取0.05g維生素K1標準品(*到0.1mg),于25mL容量瓶中,用正己烷溶解定容。

4.15.2 維生素K1標準中間液(20μg/mL):取標準貯備液(4.15.1)1mL加正己烷定容至100mL。

5.儀器和設備

5.1 高效液相色譜儀,帶有熒光檢測器。

5.2 天平:感量為0.1mg。

5.3 分液漏斗:250mL。

5.4 旋轉蒸發器。

5.5 恒溫空氣浴振蕩器。

5.6 離心機:轉速≥3000轉/分鐘。

5.7 氮吹儀。

6.分析步驟

6.1 試樣處理

6.1.1 含淀粉的試樣

稱取混合均勻的固體試樣約2.5g或液體試樣約10g(*到0.1mg)于三角瓶中,加入0.5g淀粉酶(4.12),用30mL溫水溶解。

6.1.2 不含淀粉的試樣

稱取混合均勻的固體試樣約2.5g或液體試樣約10g(*到0.1mg)于三角瓶中,用30mL溫水溶解。

6.2 測定液的制備

向上述處理過的試樣溶液中加入1g脂肪酶(4.13),于37℃±5℃恒溫空氣浴振蕩器中振蕩過夜使其充分酶解。取岀酶解好的試樣,加入2nL氫氧化鈉溶液(4.1),用50nL乙醇(4.2)將溶液轉入250mL的分液漏斗中,充分混勻(必要時加少量飽和氯化鈉溶液(4.3))。加入50mL正己烷(4.4)。充分振搖2min,靜置分層。放出下層水相于另一個250mL分液漏斗中,留下有機相。向水相中再次加入50mL正己烷再次萃取。合并有機相。用適量蒸餾水洗有杋相兩次。將有機相通過無水硫酸鈉(4.5)脫水過濾到一個500mL的燒瓶中,在旋轉蒸發器上于40℃±2℃下蒸發至近干。用正己烷(4.4)轉移殘留物到一個10mL試管中,置氮吹儀上于40℃±2℃下吹干,準確加入1mL正己烷(4.4),充分振蕩溶解殘留物。將試管放入冰箱中在0℃以下冷凍h備用。

6.3 測定

6.3.1 色譜參考條件

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